Исследование функционирования ЩЖ

Функциональная активность щитовидной железы. Продолжение

Определение Т4 методом конкурентного связывания. 

Принцип метода состоит в том, что возрастающие количества Т4, добавляемые в систему, содержащую Т4 — I126 и ТСГ, пропорционально снижают связывание Т4 — I128 с ТСГ. Комплекс связанного с белком Т4 — I125 отделяется от свободного Т4 — I125 с помощью ионообменных смол. По известным количествам добавляемого Т4 строится калибровочная кривая и рассчитывается количество Т4 в исследуемых образцах. Содержание Т4 при эутиреозе колеблется от 5,0 до 13,7 мкг% при использовании системы Res—О—Mat—Т4— I126. В пересчете на йод метод дает значения, близкие к БЭЙ. В отличие от методов определения СБЙ и БЭЙ на результаты, полученные методом конкурентного связывания, не влияет предшествующий исследованию прием органических (негормональных) соединений йода. Изменения тироксин-связывающей способности крови в такой же степени отражается на результатах определения Т4.

Определение Т3 радиоиммунологическим методом стало возможным после получения специфической иммуносыворотки к Т3. В качестве шлеппера может быть использован сывороточный альбумин. Тироксин-связывающий глобулин и альбумин (ТСА) связывают Т3 менее прочно, чем Т4, но создают определенные трудности при радиоиммунологическом определении Т3, препятствующие внедрению метода в широкую диагностическую практику. В крови здоровых людей содержание Т3 при использовании различных модификаций метода колеблется от 100 до 300 нг%

Свободный (не связанный с белками) Т4 определяется путем диализа неразведенной сыворотки крови с добавлением к ней Т4—I125 против безбелкового буфера. Определяемое в диализате после отделения от неорганического I125 количество Т4—I128 отражает процент свободного Т4 в крови. У здоровых людей свободный Т4 составляет около 0,02% от общего Т4 сыворотки крови. Зная количество общего Т4, можно рассчитать абсолютное количество свободного гормона в сыворотке крови. По Anderson (1968), содержание свободного Т4 в норме составляет 1,77 ± 0,25 нг%, при гипертиреозе 8,47 ± 2,87 нг%, при гипотиреозе 0,54 ± 0,29 нг%.

Чтобы с максимальной точностью оценить функциональную активность щитовидной железы по уровню тиреоидных гормонов в крови, необходимо иметь дополнительные сведения или о содержании свободного Т4 или о тироксин-связывающей способности белков сыворотки крови. Так как определение свободного Т4 представляет значительные трудности, особую диагностическую ценность приобретают методы исследования тироксин-связывающей способности белков сыворотки крови. Предложен радиоиммунологический метод определения TCP, связывающего в норме около 75% тироксина. У здоровых людей концентрация ТСГ в крови составляет 2,0—4,8 мг%. Для клинического использования более пригоден тест связывания Т3 смолами in vitro. Этот метод дает косвенное представление о количестве свободных (не связанных с Т4) тироксин-связывающих белков, в первую очередь ТСГ. Принцип метода состоит в том, что добавленный к плазме крови меченый Т3 (Т3—I125) связывается со свободными рецепторами ТСГ и ТСА. Поскольку сродство Т3 с этими белками менее выражено, чем у Т4, избыток Т3—I125 не вытесняет связанный с белками Т4, а абсорбируется на поверхности добавляемых в систему смол или других абсорбентов, например эритроцитов. При гипертиреозе число свободных рецепторов мало и, соответственно, большее количество Т3—I128 связывается смолами. При гипотиреозе низкий уровень Т4 сочетается с большим количеством свободных рецепторов и меньший процент Т3—I125 связывается смолами. Результаты пробы выражаются в относи¬тельных величинах и сильно варьируют от деталей постановки исследования. При сопоставлении результатов связывания Т3 с контрольной сывороткой крови (система Т3—Res—О—Mat—I125) эутиреоидные значения составляют 0,87—1,13, при гипертиреозе — ниже 0,87, при гипотиреозе превышают 1,13. Оценка результатов при использовании других модификаций метода приведена в обзоре Holan (1973).

Читать далее.